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诊断学第七版教材-第84章

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分叶常层叠呈堆集状。染色质粗糙,排列致密呈团块状,染深紫红色。胞质极丰富,呈淡
紫红色,其内充满大量细小紫红色颗粒,有时可见边缘处颗粒聚集成簇,但周围无血小板
形成。
    (4)产血小板型巨核细胞(thronbocytogenotJs rnegakaryc)cyte,成熟型巨核细胞):
胞质内颗粒明显聚集成簇,有血小板形成,胞质周缘部分已裂解为血小板脱落,使细胞边
缘不完整,其内侧和外侧常有成簇的血小板出现。其余的细胞特征均与颗粒型巨核细胞
相同。
    (5)巨核细胞裸核(na。ked nucleus):产血小板型巨核细胞的胞质裂解成血小板完全
脱落后,仅剩细胞核时,称为裸核。
    7.其他细胞  骨髓中还可以见到网状细胞、内皮细胞、纤维细胞、组织嗜碱细胞、
成骨细胞、破骨细胞及一些退化细胞如退化的淋巴细胞、Ferrata细胞、退化破坏的嗜酸
性粒细胞等。
三、血细胞的细胞化学染色
    细胞化学染色是以细胞形态学为基础,根据化学反应原理,应用骨髓涂片按一定程序
染色,然后在显微镜下观察细胞化学成分及其变化的一项检查方法。各种类型血细胞中的
化学成分、含量及其分布不尽相同,在病理情况下,也可发生改变。因此,细胞化学染色
有助于了解各种血细胞的化学组成及病理生理改变,可用作血细胞类型的鉴别,以及对某
些血液病的诊断和鉴别诊断、疗效观察、发病机制探讨等有一定价值。
    细胞化学染色的方法较多,主要介绍常用的酶类、脂类、糖原、铁等细胞化学染色。
    (一)过氧化物酶染色
    【原理】  血细胞中的过氧化物酶(peroxidase,Pox)能分解试剂中的底物H。o。,释
出新生态氧,使无色联苯胺氧化为蓝色联苯胺,后者与亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色的
第二章|临睬血液学检溅
颗粒,沉着于细胞质中。
    【结果】胞质中无蓝黑色颗粒者为阴性反应,出现细小颗粒、分布稀疏者为弱阳性反
应,颗粒粗大而密集者为强阳性反应。
    【临床意义】主要用于急性白血病类型的鉴别。急性粒细胞白血病时,白血病细胞多
呈强阳性反应;急性单核细胞白血病时呈弱阳性或阴性反应;急性淋巴细胞白血病则呈阴
性反应。POX染色对急性粒细胞白血病与急性淋巴细胞白血病的鉴别最有价值。
    (二)苏丹黑B染色
    【原理】  苏丹黑B(sudan black B,sB)是一种脂溶性染料,可溶于细胞质内的含脂
物质,使胞质中的脂类物质呈棕黑色或深黑色颗粒。
    【结果】结果与PoX染色大致相同。粒细胞系自早幼粒细胞起至成熟中性粒细胞,阳
性反应随细胞的成熟逐渐增强。单核细胞系大多呈弱阳性反应。淋巴细胞系呈阴性反应。
    【临床意义】  同Pox染色反应。
    (三)中性粒细胞碱?陛磷酸酶染色
    【原理】  中性粒细胞碱性磷酸酶(neutrophil alkaline phosphatase,NAP)的显示方
法有偶氮偶联法和钙一钴法两种。前者的染色原理是血细胞内碱性磷酸酶在pH为9.4~
9.6的条件下,将基质液中的a一磷酸萘酚钠水解,产生n一萘酚与重氮盐偶联形成灰黑色
沉淀,定位于细胞质内酶活性所在之处。钙一钴法染色是碱性磷酸酶在碱性条件下将基质
液中的p一甘油磷酸钠水解,产生磷酸钠。磷酸钠依次与硝酸钙、硝酸钴、硫化胺发生反
应,形成不溶性棕黑色的硫化钴,定位于酶活性之处。
    【结果】碱性磷酸酶主要存在于成熟阶段的中性粒细胞(分叶核及杆状核),其他血
细胞均呈阴性反应。阳性反应为胞质中出现灰色到棕黑色颗粒,反应强度分为5级,即
“一”、“1+”、“2+”、“3+”、“4+''o反应结果以阳性反应细胞百分率和积分值来表示。
血涂片染色后,在油浸镜下,观察100个成熟中性粒细胞,阳性反应细胞所占百分率即为
阳性率;对所有阳性反应细胞逐个按反应强度分级,将各级所占的百分率乘以级数,然后
相加,即为积分值。
    【参考值】成人NAP阳性率10%~40%;积分值40~80(分)。由于各实验室条件
不同,参考值也有差异。应建立本实验室的参考值。
    【临床意义】NAP活性可因年龄、性别、应激状态、月经周期、妊娠及分娩等因素
有一定的生理性变化。在病理情况下,NAP活性的变化常有助于某些疾病的诊断和鉴别
诊断。
    1.感染性疾病  急性化脓菌感染时NAP活性明显增高,病毒性感染时其活性在正常
范围或略减低。
    2.慢性粒细胞白血病的NAP活性明显减低,积分值常为O。类白血病反应的NAP活
性极度增高,故可作为与慢性粒细胞白血病鉴别的一个重要指标。
    3.急性粒细胞白血病时NAP积分值减低;急性淋巴细胞白血病的NAP积分值多增
高;急性单核细胞白血病时一般正常或减低。
    4.再生障碍性贫血时NAP活性增高;阵发性睡眠性血红蛋白尿时活性减低,因此也
可作为两者鉴别的参考。
    5.其他血液病:恶性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、骨髓增殖性疾病如真性红细胞
增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化症等NAP活性中度增高,恶性组织细胞病时
NAP活性降低。
    6.腺垂体或肾上腺皮质功能亢进,应用肾上腺皮质激素、ACTH、雌激素等NAP积
分值可增高。
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    (四)酸性磷酸酶染色
    【原理】  酸性磷酸酶(acid phoshatase,ACP)染色法有硫化铅法和偶氮偶联法。硫
化铅法原理为血细胞内的酸性磷酸酶等在酸性条件下(pH5.O)将基质液中的p甘油磷酸
钠水解,产生磷酸钠,然后与硝酸铅反应,生成磷酸铅沉淀,再与硫化铵反应形成棕黑色
硫化铅沉淀,定位于细胞质内。
    【结果】胞质内出现棕黑色颗粒者为阳性反应。
    【临床意义】
    1.协助诊断多毛细胞白血病(hairy cell leukemia,HcL)。多毛细胞白血病时多毛细
胞AcP呈阳性或强阳性反应,且其活性不被L一酒石酸所抑制,有助于对本病的诊断。
    2.协助鉴别T淋巴细胞与B淋巴细胞。T淋巴细胞呈阳性反应,B淋巴细胞呈阴性
反应,有助于急性淋巴细胞白血病的免疫学分型。
    3.协助鉴别Gaucher病与Niemann—Pick病。Galacher。细胞AcP呈阳性,而Nie—
mann—Pick细胞为阴性反应。
    4.单核细胞、组织细胞、网状细胞、巨核细胞AcP染色均呈阴性反应。
    (五)氯化醋酸AS—D萘酚酯酶染色
    【原理】  血细胞内氯化醋酸AS—D萘酚酯酶(naphth01 AS—D chlot’oacetate esterase,
As—D NCE)又称特异性酯酶(specific esterase,SE)、粒细胞酯酶。此酶能将基质液中
的氯化醋酯AS—D萘酚水解,产生萘酚As—D,进而与重氮盐GBC偶联,形成不溶性红色
沉淀,定位于细胞质内。    ,
    【结果】胞质中出现红色沉淀者为阳性反应。此酶主要存在于粒系细胞中,原粒细胞
为阴性反应或弱阳性反应,自早幼粒细胞至成熟中性粒细胞均呈阳性反应,早幼粒细胞呈
强阳性反应,酶活性随细胞的成熟而逐渐减弱。嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、浆
细胞、幼红细胞一般均呈阴性反应,个别单核细胞可呈弱阳性反应。
    【临床意义】  急性粒细胞自血病时原粒细胞和早幼粒细胞酶活性明显增强,AS—D
NcE染色呈强阳性反应;急性单核细胞白血病及急性淋巴细胞白血病时均呈阴性反应;
急性粒一单核细胞白血病时,部分白血病细胞(粒系)呈阳性反应,而有些白血病细胞
(单核系)呈阴性反应。
    (六)a一醋酸萘酚酯酶染色
    【原理】  0c一醋酸萘酚酯酶(alpha—naphthol acctate esterase,d—NAE)又称非特异性
酯酶(non—specl‘fic esterase,NSE),能将基质液中的a一醋酸萘酚水解,产生a一萘酚,再
与重氮染料偶联,形成不溶性的有色沉淀,定位于胞质内。
    【结果】胞质中出现有色沉淀者为阳性反应。因所用的重氮盐不同,阳性反应的沉淀
可分灰黑色或棕黑色。此酶主要存在于单核系细胞中,故有人称之为单核细胞型酯酶。原
单核细胞为阴性反应或弱阳性反应,幼单核细胞和单核细胞呈阳性反应。粒系细胞一般为
阴性或弱阳性反应。淋巴细胞一般为阴性反应。
    【临床意义】急性单核细胞白血病细胞呈强阳性反应,但单核细胞中的酶活性可被氟
化钠(NaF)抑制,故在进行染色时,常同时做氟化钠抑制试验。急性粒细胞白血病时,
呈阴性反应或弱阳性反应,但阳性反应不被氟化钠抑制。因此,本染色法主要用于急性单
核细胞白血病与急性粒细胞白血病的鉴别。
    (七)糖原染色
    【原理】糖原染色,又称过碘酸…Sctlift反应(per‘iodic:acid—Schiff’s reactiorl,PAS
反应)。过碘酸能将血细胞内的糖原氧化,生成醛基。醛基与Schiff液中的无色品红结合,
募二章|I
临床血液学检测
形成紫红色化合物,定位于胞质内。
    【结果】  胞质中出现红色者为阳性反应。阳性反应物可呈颗粒状、小块状或弥漫均匀
红色。PAS反应的阳性程度通常以强阳性、阳性、弱阳性和阴性来表示。也有用阳性百分
率(观察同一类型细胞的阳性细胞率)和积分值来表示。
    正常血细胞的PAS染色反应:粒系细胞中原粒细胞为阴性反应,自早幼粒细胞至中
性分叶核粒细胞均呈阳性反应,并随细胞的成熟,阳性反应程度渐增强;单核细胞呈弱阳
性反应;淋巴细胞大多呈阴性反应,少数可呈弱阳性反应;幼红细胞和红细胞均呈阴性反
应;巨核细胞和liltd;板均呈阳性反应,巨核细胞的阳性反应程度随细胞
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